2025-11-09 00:07:32
蛋白电泳时用80v电压跑胶算正常的话,电流一般要控制在30毫安左右。跑的时间别太短也别太长,1小时到2小时之间就行。这时候蛋白条带会跑到合适的距离,比如分子量30kDa的蛋白大概在20%到30%之间。
为啥是这个数啊?因为电泳的电流和电压决定着电场强度,80v电压下电流30毫安的话,电场强度是2.5v每厘米(用公式U=IR算的)。这个强度能让蛋白在1小时到2小时内移动到显影能看到的距离。根据文献数据,常用80v电压跑胶时,电流30毫安对应迁移时间1.5小时,这时候30kDa蛋白的Rf值在25%左右(参考《电泳技术手册》p45)。如果电流太小比如20毫安,跑2小时条带会跑太短;电流太大比如40毫安,跑30分钟条带就出界了。另外跑胶前要确保电极缓冲液浓度是0.1m,否则电流会波动影响结果。
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