亚甲蓝试验主要是看细菌能不能分解亚甲蓝染料。操作时把细菌涂在试纸上，滴上染料，过几分钟观察颜色变化。如果试纸变蓝就是阳性，说明细菌有氧化酶活性；如果保持紫色就是阴性，说明没有这种酶。判定标准就这两个颜色结果，简单直接不用复杂计算。

为什么这样判定呢？因为亚甲蓝在氧化酶作用下会被还原成无色物质，同时释放出还原态的蓝色产物。据《临床微生物学检验指南》显示，阳性结果准确率达92%，但有个别非氧化酶菌（比如部分肠球菌）可能因产过氧化氢酶导致假阳性。实际操作中要结合菌落形态和后续试验，比如阴性结果再试过氧化氢酶试验。比如有个研究说，把亚甲蓝试验和过氧化氢酶试验联合使用，可将误判率从8%降到2%以下。所以判定标准虽然简单，但背后有科学依据和配套验证方法。