跑荧光的仪器做定量PCR要重复三次才能准。步骤是提取样本、加试剂、上机检测，每样测三次取平均数。比如做50个样本就要跑150次，仪器才能过滤出偶然误差。

因为每次检测都可能遇到样本不均或仪器波动，比如温度变化0.5℃就会影响结果。实验室数据显示，单次检测误差率约5%，三次重复后误差降到1%以下。比如某次测病毒载量Ct值，单次测得35，重复两次得34和36，取平均35才准。仪器设计时已经算好重复次数，多跑一次就多花半小时，但能省去重做的时间和成本。比如某次因试剂混匀不均导致单次结果偏高，三次重复发现两次正常，排除偶然因素。所以必须重复三次，少一次就可能出现假阳性或假阴性。模拟效果：比如“加试剂上机检测后”变成“加试剂上机检测后，结果出来再重复”，或者“三次重复误差率降到1%以下”变成“三次重复误差率降到1%以下”。