转染时加的质粒量就是让质粒和细胞的比例合适，太多会撑爆细胞，太少进不去，所以得找平衡点。比如实验室常用的方法是2微克质粒转10万细胞，这样既能保证质粒进入足够多，又不会让细胞撑破。比如有人试过加5微克转10万细胞，结果细胞大量死亡；加1微克转10万细胞，结果只有30%质粒进去。

为什么是这个答案呢？首先质粒太多会撑破细胞膜，细胞会直接死掉。比如有研究说转5微克质粒到10万细胞，存活率只有15%，而2微克时存活率能到85%。其次质粒太少根本进不去，比如1微克转10万细胞，只有30%能进去，而2微克能到60%。时间上要控制在2小时，超过3小时细胞就废了。比如有个实验室试过加3微克，结果细胞死得比谁都快。所以得找个中间值，既不会撑破细胞，又能让质粒进去足够多。比如现在很多实验室都固定用2微克转10万细胞，这样既安全又有效。