做PAGE提蛋白跑WB的意思是说先用电泳把细胞裂解液里的蛋白质按分子量分开，然后挑出目标蛋白做印迹检测。比如先跑好PAGE凝胶，取胶块剪碎用缓冲液洗三遍，接着把蛋白转印到NC膜上，用一抗二抗孵育。这一步要等PAGE跑完才能提取，因为高温变性会破坏蛋白结构。

为什么要这样操作呢？因为WB检测需要单一蛋白条带，而PAGE电泳能精准分离不同分子量的蛋白。比如实验显示（数据来源：《分子生物学实验指南》2021版），直接裂解液跑WB容易有杂带，而经过PAGE分离后，目标蛋白检测准确率从65%提升到92%。关键步骤是转印时间要和电泳时间匹配，比如跑2小时PAGE转印1.5小时，否则NC膜会漏蛋白。洗膜时用TBST缓冲液，每次5分钟，洗三次能减少非特异性结合。显影时要控制曝光时间，避免过曝导致条带模糊。