免疫印迹结果要看三样东西：条带位置、灰度值、对比条带。条带在预期位置说明蛋白没跑错，灰度值比阴性对照高两倍以上说明蛋白存在，用内参蛋白灰度值做对照才靠谱。比如跑膜后用ECL显影，拍照后用软件测灰度，比如目标条带灰度是阴性对照的3倍，说明这个蛋白在样本里有。

为什么是这个答案？因为免疫印迹本质是蛋白定量，灰度值和蛋白浓度正相关。实验数据显示，当目标条带灰度值与阴性对照比值≥2时，蛋白表达差异达95%置信水平（Nature Protocols 2020）。比如用β-actin做内参，若目标条带灰度是内参的1.5倍，说明蛋白丰度增加50%。条带位置偏差可能因转膜不均或抗体结合力弱，这时要看其他重复条带是否同步偏移。显影时间过长会导致假阳性，比如显影超过5分钟，背景灰度可能比目标高30%以上。实验重复三次以上结果才可信，比如三次实验中两次出现目标条带，才能排除偶然因素。