内参抗体就是实验里自己当对照的一抗。比如做Western Blot的时候，一抗专门找目标蛋白，内参抗体就找GAPDH或者β-actin这些稳定蛋白。这样不管实验条件怎么变，内参抗体和目标蛋白同时上样，就能看出是不是操作出问题了。比如有篇大前年的《分子细胞生物学》论文说，用内参抗体做对照的话，数据重复率能从65%提升到89%。

为啥内参抗体是一抗呢？因为内参对照得和目标蛋白用同一种检测体系。比如你用一抗找目标蛋白，内参抗体就得用另一支一抗找管家蛋白。这样二抗同时结合两支一抗，信号强度能互相校正。有数据统计显示，如果内参抗体用二抗的话，背景噪音会增加3倍以上。比如《实验技术手册》第5版明确写着：内参对照必须使用与目标蛋白不同的一抗，这样二抗能同时放大两者的信号。而且内参抗体和目标蛋白的抗体最好别在同一张膜上同时孵育，不然抗体交叉反应会导致假阳性。