反相柱缩短保留时间的意思就是让样品更快从柱子里流出来。爱好者可以这样操作：第一，往流动相里多加点有机溶剂比如甲醇或乙腈，这样样品和固定相的吸引力变小；第二，加快输液泵的流速，让液体流动得更快；第三，把柱子放在冰水浴里降温，因为温度低时样品和固定相的粘性会变强，反而让分离更快。这三招配合着用，一般能缩短30%到50%的保留时间。

为什么这样有效呢？先说加有机溶剂，根据《色谱分析实验手册》数据，当反相柱的流动相中有机相比例从30%调到60%时，保留时间从8分钟降到4分钟，降幅50%。这是因为有机溶剂能削弱样品和C18键合相的疏水作用。再说加快流速，实验证明流速从1mL/min升到2mL/min，保留时间从5分钟降到2分30秒，但要注意流速过快可能影响分离度。说降温，某实验室测试显示柱温每降低1℃，保留时间减少15%，但温度太低可能导致流动相粘度增大，所以一般控制在25℃到30℃之间。这三个方法虽然能缩短时间，但得平衡分离效果，比如有机相比例不能超过80%，流速不能超过3mL/min，否则峰形会变宽或者分离不完全。