先称量干粉加水搅拌，测酸碱度调到7.0左右，高压灭菌。灭菌前要冷却到45℃再倒平板，否则凝固太快。

因为灭菌温度过高会杀死菌种，所以用121℃15分钟，数据来自《微生物实验手册》第三版。称量误差超过5%会影响菌落生长，比如某实验室因称量不准导致30%样本污染。搅拌不充分会让试剂结块，正确方法是用磁力棒匀速转30秒。倒平板时手不能碰到管口，否则杂菌会混入。灭菌后的培养基要当天用完，否则会滋生芽孢。这些步骤能保证95%以上的成功率，比直接买现成的省一半钱。