培养细胞的时候双抗要按比例稀释再添加到培养液里。比如用生理盐水或培养基把双抗原液稀释1000倍，这样每天加到培养液里就不会毒害细胞了。稀释的时候要记得摇匀，避免沉淀影响效果。

为什么这么操作呢？因为双抗浓度太高会直接毒害细胞，特别是鼠源单抗如果浓度超过0.1μg/mL就会抑制细胞生长。根据《细胞培养技术手册》数据，ConA双抗推荐使用浓度是0.1-1μg/mL，稀释1000倍刚好在安全范围内。直接往细胞里加原液就像往火锅里倒整瓶辣椒酱一样，肯定烧坏细胞。正确的操作是先在培养液里稀释好，再慢慢加到细胞里，这样既保证抗体活性又不会浓度过高。比如用1ml原液加999ml生理盐水，摇匀后每天取1ml加到100ml培养液里，这样算下来每天实际浓度就是0.1μg/mL，刚好符合文献建议的最低有效浓度。要是浓度太高了，细胞就像被辣椒呛到一样死得快，浓度太低了又起不到筛选作用。所以必须按这个比例稀释，就像煮面要先用冷水泡面一样，先稀释再使用才是正确方法。