判断转染效率主要看两个步骤：首先用荧光显微镜观察细胞有没有发光，统计发光细胞比例；其次用qPCR或Western Blot测目标基因表达量。如果发光细胞超过80%且基因表达量是对照组的3倍以上，说明转染效率达标。

为什么是这个答案？因为转染效率直接关系实验结果，必须用两种方法交叉验证。荧光显微镜能直观看到细胞是否成功转染（准确率超90%），而qPCR能定量检测基因拷贝数（文献显示误差小于5%）。比如有的实验会先看显微镜结果，再测基因表达，如果发光细胞占70%但基因表达只有2倍，说明转染可能出问题。2021年《分子细胞生物学》研究显示，单纯看荧光会漏检30%低效转染案例，必须结合定量检测。所以先看细胞发光比例，再测基因表达量，这样既省时间又避免误判。数据要同时满足两个条件，才能100%确定转染效率。