柱效就是色谱柱把不同物质分开的能力，数值越高说明分离效果越好。测定公式是理论塔板数N等于五点五四乘以保留时间除以峰宽的平方，保留时间越长峰宽越宽，但柱效不一定高。柱长和填料颗粒大小也会影响，颗粒越小柱效越高，但柱长太长可能让分离变慢。

为什么是这个公式呢？先看保留时间，比如某物质在3分钟出峰，峰宽0.5分钟，代入公式算出N是5.54(3/0.5)^2=198，这个数值说明柱效中等。实际实验中，C18柱常用5000-15000塔板数，流速1ml/min时柱效最好。比如某样品用2ml/min流速，柱长250mm，算出N=8300，比1ml/min的N=12000低，说明流速快会降低柱效。数据证明，当填料颗粒从5μm换成3μm，柱效提升3倍，但柱压增加2倍。所以选柱要平衡分离效率和操作压力，新手可以先调流速到0.8-1.2ml/min，柱长选250-300mm，这样既保证柱效又不会太费时间。