2025-11-09 00:17:47
单向测序就是只从DNA的一端读取序列,不用管另一头。操作起来分几步走:先准备好样本,用酶切把DNA打开,接着连上接头,然后加引物扩增,用仪器测序。扩增后的产物要纯化,否则影响读数。测序完拿到数据后,得用软件比对参考序列,算出差异点。整个过程成本低,适合快速筛查。
为啥要这样搞呢?因为单向测序省事省力,成本能砍半。比如用普通测序仪,单向法每条序列只要5美元,双向法要10美元。数据错误率也差不多,单向法3.5%,双向法3.2%。虽然双向法更准,但单向法省下的钱够做十次实验。而且现在测序仪越来越便宜,单向法足够用。比如前年《自然》论文说,用单向测序筛查病毒基因,成本比双向法低70%,结果误差不超过0.1%。扩增后的条带要跑胶确认,不然数据乱码。测序仪跑完得等两小时,期间得盯着机器别出故障。数据出来后要导出来,用Excel或专业软件分析,找突变点。虽然单向法有局限,但省时省力够用。
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