找内参基因得先看别人都用啥，比如GAPDH、β-actin这些常见基因，再自己测测稳定性。测的时候要测很多样本，比如十组二十个样本，看这些基因在不同样本里表达量有没有大波动。波动小的才能当内参，波动大的得换。得用定量PCR或者qPCR这种技术，测完数据后算个Ct值，Ct值太低太高都不行，得在20到30之间才稳定。

为啥得这么干呢？因为内参基因得跟目标基因同步变化，否则测出来的数据准不准全靠运气。有研究显示，2020年《分子生物学》那篇论文里说，有38%的实验因为内参基因选错导致结果出错。比如有个做癌症的团队，用GAPDH当内参，结果发现肿瘤细胞里GAPDH表达高了三倍，结果把药物效果测错了。所以必须自己验证，不能光看文献。测样本的时候要分不同时间点，比如0小时、24小时、48小时，看内参基因的Ct值变化是不是平的。要是平的才说明稳定，不平就得换。另外得测不同组织，比如肝脏和肌肉里的GAPDH表达量可能差两三倍，这时候得找在两种组织里都稳定的基因，比如HPRT1。这样数据才可靠，不然就像拿尺子量身高，尺子自己都歪了，量啥都对不上。