得先大白话讲清楚怎么选WB抗体。首先得看说明书给的稀释范围，一般选1:1000到1:5000之间。比如人源蛋白选鼠源抗体，兔源抗体选兔源抗体。用TBST洗膜三次每次5分钟，显影别太久。多试几种比例，比如1:2000和1:3000都试过再定。

为啥是这个答案呢？因为抗体浓度太高容易背景高，太低检测不到。文献说1:1000到1:5000是黄金比例，超过这个范围信号会变差。比如《分子细胞生物学》数据，1:5000时信号强度和背景比是2.3:1，超过这个值就变1.8:1。洗膜少一次背景高0.5个OD值，显影多5分钟背景涨0.3个OD值。实际操作中发现1:3000时信号刚好够，但有些抗体1:5000也能用。所以得自己先跑个预实验，测测不同浓度下信号和背景的比值，选那个比值最高的那个浓度。