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怎么调rna浓度-rna浓度换算

2025-11-09 00:20:08  

怎么调rna浓度-rna浓度换算

优质解答

调整RNA浓度主要是通过稀释或浓缩来改变其浓度值。比如用离心机取1ml样本加9ml缓冲液稀释10倍,或者用柱纯化法浓缩低浓度样本。浓度换算就是根据体积和浓度比例计算新浓度,比如1mg/ml的RNA加9ml水后浓度变成0.1mg/ml。

为什么是这个答案呢?因为RNA浓度过高会影响实验,比如qPCR会假阳性,过低则检测不到。根据《分子生物学实验指南》数据,细胞裂解液中的RNA浓度通常在1-10mg/ml,而荧光定量需要20-100ng/ml。假设原浓度是5mg/ml,要降到50ng/ml得稀释100倍(1:100)。比如取50ul原液加950ul缓冲液,总1ml后浓度就是0.05mg/ml(50ng/ml)。离心机转3000转每分钟转5分钟就能沉淀杂质,柱纯化时洗脱液每步加50ul,浓缩后体积减少10倍浓度就翻倍。比如1mg/ml的RNA经过浓缩后变成10mg/ml,但体积只有0.1ml。这些操作都基于NIST的浓度计算公式C1V1=C2V2,比如原浓度C1=1mg/ml,体积V1=100ul,要得到C2=0.1mg/ml,算出V2=1000ul,就是加900ul水稀释。实验发现稀释误差不超过5%时结果可靠,而浓缩时温度要控制在4℃防止降解。

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RNA浓度调整浓度换算