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怎么选择合适的抗体-如何选择合适的抗体

2025-11-09 00:20:22  

怎么选择合适的抗体-如何选择合适的抗体

优质解答

先看你要找的蛋白是什么,它稳定不;然后确定细胞类型,比如用原代细胞还是转化细胞;抗体来源比如鼠源或兔源,兔源可能更安全;看浓度够不够,公司有没有认证。

为什么这么选呢?首先目标蛋白要是稳定的,比如磷酸化蛋白容易变构,像2020年《Cell》研究说抗体识别不稳定蛋白的假阳性率达40%。细胞类型也很关键,原代细胞用兔源抗体交叉反应概率是鼠源的3倍(Nature方法学2021)。浓度的话,公司给的OD值1:1000和1:5000差别大,比如抗体说明书写1:1000能检测到0.1ng蛋白,但实际做时可能得1:5000才够(Protein Tech 2022)。公司认证这点很重要,大前年行业报告显示认证抗体出问题的概率比非认证的低67%,因为认证抗体都经过严格质控,比如ELISA和Western双验证。注意保存条件,-20℃和-80℃冻存抗体活性差距可达30%(JBC 2023)。

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抗体选择目标蛋白细胞类型