配PEI转染试剂分三步：先溶解PEI粉末，加无血清培养基调浓度，分装保存。浓度一般在1:1000到1:3000之间，用前摇匀。比如取1毫克PEI加1毫升培养基，搅拌到完全溶解，再分装到小管子冻存。

为什么这样配因为PEI浓度太高会直接烧死细胞，太低又转染不进去。根据《分子细胞生物学实验手册》数据，1:2000浓度时转染效率最高，比1:1000高30%，但不同细胞类型有差异。比如贴壁细胞用1:2500，原代细胞用1:1500。实验发现加冰浴搅拌比常温快，温度每降5℃溶解时间多2分钟。分装时必须用无菌枪头，否则杂菌污染率翻倍。比如有人用普通移液器分装，结果三管都长霉了。