手性柱主要是用来分离对映异构体的色谱柱，它里面的固定相含有手性分子，就像给样品装了个"照妖镜"，能把左旋和右旋的分子区分开。冲柱的时候要先用甲醇或乙腈洗三天，让填料充分湿润，接着用不同浓度的流动相慢慢洗，用纯水冲干净。这样做的目的是让手性分子均匀分布在柱子填料里，避免分离效果差。

手性柱冲柱这么操作是因为手性分子之间容易形成氢键或范德华力，如果柱子没冲好，这些分子会黏在填料表面，导致分离度下降。实验数据显示，新柱子如果不平衡直接进样，分离度可能从1.5掉到0.8以下。比如用D-氨基酸手性柱分离对映体，冲柱后分离度能达到1.7-2.1，柱效稳定在12000-15000塔板/米。冲柱时控制流速在1ml/min，让流动相有足够时间渗透填料间隙，这样填料颗粒间的空隙就能均匀分布，保证每次进样都能得到稳定的峰形。如果流速太快，比如超过2ml/min，空隙里残留的样品就会拖尾，就像水流过急冲不干净一样。另外甲醇和乙腈的洗脱能力顺序是乙腈>甲醇>水，所以先用高浓度洗，再用低浓度洗，用水冲，这样就像先洗掉表面污垢再冲内部缝隙，用纯水漂洗。