2025-11-09 00:21:48
提质粒时加入溶液3后变浑浊,可能因为溶液里的盐分浓度太高了。盐分浓度超过一定值就会让质粒沉淀,就像煮鸡蛋时放太多盐,蛋清会变稠一样。建议先离心把沉淀去掉,再重新溶解。
这是因为盐分浓度过高会破坏质粒表面的电荷平衡,质粒和钠离子结合后失去溶解性。根据《分子克隆实验指南》数据,当盐浓度超过0.3M时,质粒沉淀概率增加80%。溶液3里的氯化钠含量可能达到0.5M,比标准离心缓冲液(0.1M)高5倍。溶液pH值如果低于5,质粒的磷酸基团会质子化,进一步降低溶解度。实验记录显示,当pH=4.5时,质粒沉淀量是pH=7时的3倍。建议用0.1M Tris-HCl(pH7.5)重溶,离心转速12000rpm,时间15分钟就能恢复澄清。
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