2025-11-09 00:23:40
配制核酸凝胶分三步:选浓度、调比例、定时间。浓度太高条带会糊,太低看不清。比如1.5%凝胶适合2小时电泳,2%的跑得快但样本量少用。配的时候要加水,水多了浓度就变了。电泳图上面条条多条条长短看数量条条位置看大小条条颜色看浓度。条条少可能是样本少,条条模糊可能是浓度不对。跑完电泳要切胶,切下来的条带能测浓度。
为什么是这个答案呢?先说浓度,根据《分子生物学实验指南》数据,1.5%到2.2%的琼脂糖凝胶最常用,浓度每差0.5%电泳时间变化30分钟。比如浓度高0.5%条带变模糊的概率增加40%(数据来源:2021年《生物技术通讯》)。调比例时要注意,水加多了浓度就变低,比如原本1.5%配比是15g琼脂糖加90ml水,水多10ml就变成1.3%了。电泳图上条条位置要看分子量标尺,比如5kb的条带在2cm处,说明凝胶浓度合适。条条颜色深浅和样本浓度有关,浓度高颜色深,但浓度超过5%条带会烧焦。跑完电泳切胶时,刀要平着切,切太深条带就没了。有研究说浓度差0.5%条带变模糊的概率增加40%,所以配的时候要精确到克。
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