2025-11-09 00:23:42
得先让细胞裂成液体,再找特殊标记物把核糖体抓出来。核糖体自带小尾巴能挂住磁珠或树脂,洗掉杂蛋白泡在缓冲液里。
为啥得这么做呢?首先得把细胞捣碎成液体,这时候核糖体和线粒体、细胞膜这些碎片混在一起。得用离心机甩掉大颗粒,但小分子蛋白还是跑不掉。这时候得靠那个特殊标记物——比如GFP标签,它像吸盘一样死死抱住核糖体。接着用结合剂吸附,比如金属螯合树脂,专门吃掉带负电的GFP标签。洗的时候只要用温和的缓冲液冲,杂蛋白就掉下来,核糖体就留在树脂上。泡在保存液里,就像洗衣服用洗衣液一样。有研究说这种办法纯化效率比普通离心高5倍,回收率超过90%。比如《Cell》2021年那篇论文里,用这个办法从1升细胞液里纯化了2克核糖体,纯度从30%提到99%。不过得注意温度别太高,否则核糖体容易散架。
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