先放样品进-80度冰箱，等12到24小时，温度均匀了再转液氮。比如细胞样本12小时够，大块组织可能得24小时，这样内外温度差小，转液氮才不会炸裂。操作时用镊子夹样品别碰盒壁，盒盖留缝让冷气对流。液氮罐要离盒口三指宽，倒扣液氮管让氮气自己灌进去。

为啥是这个流程呢？因为-80度冰箱降温慢，样品内部和表面温度不一样。比如1厘米厚的组织块，表面到-80度只要2小时，但中心还剩5到10度温差。这时候急着转液氮，外层急冻收缩，里层没冻住就会裂开。实验室数据说，12小时降温能减少90%温差，24小时温差降到3度以内。液氮罐温度-196度比-80度低116度，温差越大越容易炸。所以必须等足够时间，让样品像冰块一样整体变硬。比如用-80度预冷4小时，温差还剩8度；预冷12小时，温差只剩2度。这时候倒扣液氮管，氮气从缝隙钻进去，样品表面瞬间结霜，内部再慢慢冻透。要是急着转，氮气冲击力大，盒盖容易飞出去，样品也容易碎成渣。