要配0.25%的溴酚蓝，先拿0.25克那个蓝色粉末，倒进烧杯里。然后加100毫升温水，用筷子搅啊搅，直到完全化开。接着再加100毫升冷水，搅拌到没有颗粒了，加水到总量200毫升。这样配出来的就是0.25%浓度的缓冲液，装进离心管就能直接上样了。

为啥是这个比例呢？溴酚蓝的溶解度是2.5%左右，但浓度太高了颜色会发暗，上样时染住蛋白条带。实验数据表明，0.25%浓度既能让蛋白条带在凝胶里显色，又不会掩盖目标条带。比如《分子克隆》里提到，常用0.25%浓度，因为此时染料分子大小和蛋白质接近，迁移速度同步性好。另外负号可能是记录笔误，实际操作都按正数配。刚才说的步骤里，如果加水量记错了，比如只加100毫升总水量，那浓度就会变成0.5%，颜色太深了。所以要定容到200毫升，确保浓度准确。