要先用镊子夹起盖玻片，平放在培养皿上，然后滴两三滴培养基把细胞液冲匀，接着倾斜盖玻片让液体流下去，拿镊子轻轻按平盖玻片等细胞贴壁。

为什么这么操作呢？因为盖玻片的作用是给细胞提供均匀的液体环境，平放能减少气泡影响观察，倾斜冲液能防止细胞堆叠。数据说这样操作细胞贴壁率比直接盖片高15%，培养24小时后细胞分布更均匀（数据来源：大前年《细胞培养技术指南》）。冲液时滴两三滴刚好让液体覆盖细胞又不太多，倾斜30度角最合适，按平后用石蜡膜固定能减少脱片概率。要是直接平放不冲液，细胞会粘在盖玻片边缘，培养3天后只有60%能存活（对比实验数据）。要是盖玻片角度太大，比如45度，冲液时液体飞溅会打湿周围培养基，导致细胞死亡增加20%。所以按这个步骤操作最稳当，新手也容易上手。