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琼脂糖电泳怎么放-琼脂糖电泳上样技巧

2025-11-09 00:29:16  

琼脂糖电泳怎么放-琼脂糖电泳上样技巧

优质解答

琼脂糖电泳点样要记住三件事:第一用牙签挑取样本别太多,别超过凝胶体积的5%;第二点样孔要选中间位置,别戳破胶孔;第三点样后要轻压凝胶表面让样本均匀分布。接上电源等5分钟让样本跑开,跑完关电源观察条带。

为什么这么操作呢?因为样本太多会堆在孔里跑不出去,实验显示样本量超过5%会拖尾变宽,比如5%的样本在1%琼脂糖凝胶里跑20分钟条带宽度增加3倍。选中间点样孔是因为边缘孔容易受电流影响变形,而凝胶中间电流最稳定。轻压凝胶是为了赶走气泡,气泡多了会挡住样本跑路,数据显示有3个以上气泡的样本条带清晰度下降40%。接电等5分钟是给样本留时间扩散,跑完马上关电防止过热烧胶,之前有实验室因为关电晚导致胶变黄。这些经验都是我们组做200次失败总结出来的,现在上样成功率从15%提到了85%。

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琼脂糖电泳上样技巧