2025-11-09 00:31:01
电镜固定液主要是让样品快速脱水固定结构,常用的有戊二醛、多聚甲醛、乙醇这些。戊二醛比例一般在0.5%到2%之间,乙醇占大部分,比如50%到70%,再加上丙酮或缓冲液调节。配的时候要现配现用,别放太久,否则会失效。
固定液配这么成是因为戊二醛能和蛋白质交联,把结构锁死,但浓度太高会变脆,太低又固定不住。比如0.5%戊二醛配50%乙醇,能平衡固定效果和样品软硬,文献里说这个比例适合细胞膜结构。多聚甲醛交联更稳定,但得用缓冲液pH7.4左右,否则会沉淀。乙醇脱水快,但浓度太高会让样品干裂,所以得掺点丙酮。配好装进离心管4度冻存,用前摇匀,不然醛类容易结晶堵针头。比如有个实验用1%戊二醛+60%乙醇,样品导电性提高了30%,但细胞核变形了,说明比例调不准会出问题。
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