盐析就是往蛋白质溶液里加大量盐，让蛋白质自己抱团沉淀下来。柱层析是用一根装了特殊材料的柱子，让不同蛋白质慢慢走过去，走得慢的先留在柱子上面，走得快的先流下来。比如说往鸡蛋清里加盐，蛋清会变稠结块，这就是盐析的原理。柱层析就像让不同颜色的积木排队过小洞，能通过的先出来，过不去的留在洞里。

为啥要这么操作呢？因为蛋白质表面有带电的基团，盐里的钠离子会抢走这些电荷，让蛋白质之间摩擦力变强，自然就聚在一起沉底了。柱层析的填料像磁铁，带正电的蛋白质会被正磁铁吸住，带负电的会被负磁铁吸住。比如说用硫酸铵做盐析，浓度从0.5M升到2.5M时，80%的蛋白质会沉淀。柱层析中，抗体和杂蛋白在柱子里的停留时间差能达到10倍以上，洗脱体积相差3-5倍。你看这样操作，盐析先沉淀掉大部分杂质，柱层析再慢慢挑出目标蛋白，就像先筛沙子再挑金子一样。不过要注意盐浓度太高会破坏蛋白质结构，柱子填料不能装太松，否则蛋白质会卡在中间出不来。