磷酸酯过柱子就是让磷酸酯溶液从柱子里面慢慢走下来。首先得准备柱子，一般用硅胶柱或者离子交换柱。把磷酸酯溶解在少量水里，然后慢慢倒进柱子里，接着用不同浓度的洗脱剂洗下来。洗脱剂浓度低的先洗，浓度高的后洗，用检测仪看看有没有洗下来。关键要控制洗脱剂的速度，太快了磷酸酯会跑太快，太慢了又容易堵住柱子。

磷酸酯是带负电的分子，所以选离子交换柱最好。离子交换柱里有带正电的物质，磷酸酯会粘在柱子表面。洗脱剂要加酸调节pH值，比如pH3.5-4.0，这样磷酸酯才能慢慢掉下来。实验数据表明，用甲醇-水（70:30）做洗脱剂时，磷酸酯的保留时间在10-15分钟，洗脱效率比纯水高3倍。装柱子的时候要慢慢倒，别急，不然柱子会塌掉。洗完之后还要用纯水冲洗柱子，不然残留的洗脱剂会影响下次实验。就像洗衣服要先加洗衣粉再加水一样，顺序不能乱。