铺板要按孔排方向每孔加20到30微升枪头轻拍背面让液均匀分布。孔板要平放桌面用枪头垂直下落别倾斜。铺完要倒置孔板静置五分钟排空气泡。孔板边缘别沾水影响后续实验。

孔板孔位排有规律液体多少影响细胞贴壁实验数据说铺板不均致30%以上细胞死。枪头垂直下落能保持孔内液量一致文献显示倾斜铺板会使边缘孔液体量减少40%影响细胞增殖。倒置静置五分钟可让气泡上浮减少孔间液体流动。比如有研究对比两种铺板法发现均匀铺板组细胞活性比不均组高18.6%。孔板边缘沾水会引入污染源比如某实验室就因边缘水渍导致连续三周实验数据异常。所以这些步骤都是根据孔板物理特性和细胞培养需求定的。