荧光定量pcr的δΔCt怎么算呢？首先得知道这个值代表的是目标基因和内参基因的相对表达量。具体步骤是先测出目标基因的Ct值，再减去内参基因的Ct值得到δCt，接着用这个δCt减去标准曲线的基准值（一般是10个循环），得到的δΔCt就是用来查标准曲线换算拷贝数的。比如用10个样本测了目的基因和GAPDH的Ct值，目的基因平均是18，GAPDH平均是22，那δCt就是18-22等于-4，再减去基准值10，δΔCt就是-14，用这个值去查标准曲线就能知道目标基因的拷贝数了。

为什么这么算呢？因为δΔCt能消除实验中的变异因素。比如标准曲线斜率是-3.5的时候，δΔCt每差1个循环，拷贝数就翻倍。假设内参基因Ct差超过10个循环，说明样本质量不好，结果不可靠。比如某次实验测了5个样本，δΔCt分别是-12、-13、-14、-15、-16，代入标准曲线发现拷贝数在1.2×10^9到1.6×10^9之间波动，说明重复性不错。但要是δΔCt忽大忽小，比如-10和-20交替出现，那就要检查是不是引物二聚体或者污染了。所以这个计算方法既简单又能保证结果准确，就像用尺子量东西，先校准尺子（标准曲线），再量物体（样本），看差多少（δΔCt）。