荧光蛋白检测就是看它会不会发光。当用紫外光或蓝光照射荧光蛋白时，它会把光变成另一种颜色的光，比如绿色或红色。检测器会收集这种特殊颜色的光，再用仪器算出浓度。整个过程就像给蛋白装了个小灯泡，灯泡亮得越久蛋白越多。

荧光蛋白发光原理基于它的结构变化。当荧光蛋白吸收特定波长的光（比如紫外光），内部的荧光素分子会变成激发态，再释放出绿光（比如GFP）。这种过程叫光致发光，持续时间约10毫秒。实验数据显示，荧光蛋白发光强度和蛋白浓度成直线关系（r²=0.99），浓度0.1ng/mL时检测灵敏度仍有0.01ng/mL。因为发光时间短，检测时要快速完成，通常控制在10秒内，否则光会衰减影响结果。比如用荧光显微镜测细胞内的蛋白，先打紫外光2秒，立即用相机拍照，这样数据准确度达95%以上。