蛋白测定就是测样品里蛋白质有多少，常用的有双缩脲法和BCA法。双缩脲法是让蛋白质和试剂反应变蓝，用分光光度计测颜色深浅算出蛋白浓度。BCA法是让蛋白质把试剂变成黄色，同样用分光光度计测颜色，还能测更低浓度的蛋白。这两种方法都需要先加试剂摇匀，然后放比色皿里测光值，对照标准曲线算出数值。比如测血清蛋白，双缩脲法适合浓度高的样品，BCA法适合浓度低的样品。

为啥要这样测呢？因为蛋白分子会形成特殊结构，遇到试剂会改变吸光特性。双缩脲法测的是肽键，反应灵敏度高，但可能受还原剂干扰；BCA法测的是巯基和酚基，干扰少但需要更长时间显色。根据《临床生物化学检验标准操作规范》，双缩脲法检测范围是2-200mg/mL，误差率±5%；BCA法检测范围0.2-50mg/mL，误差率±2.5%。比如测肌肉组织，用双缩脲法测总蛋白，测血清白蛋白则用BCA法更准。实验前要空白对照，用缓冲液调零，否则试剂本身颜色会影响结果。比如测1mL样品加5mL试剂，混匀后放5分钟再测，时间不够颜色不够深，数据就会偏低。所以操作时得看说明书，别偷懒省时间。算结果要用标准品做曲线，比如测出光值是0.5，查曲线对应就是30mg/mL的蛋白浓度。