鲁米诺发光实验主要是喷洒试剂找血迹。喷鲁米诺溶液到地面或物体表面，等五分钟左右，让溶液和血里的酶反应。接着用紫外线灯照，如果发光就是有血。发光时间大概10到30秒，暗处才能看清。

鲁米诺发光实验步骤这么设计是因为它遇到血液中的过氧化氢酶会分解过氧化氢产生化学发光。实验数据显示，鲁米诺在pH值8-10的碱性环境中最亮，发光强度可达5000流明每平方米。紫外线灯波长365nm能激发发光物质，但普通白光无效。实验中静置5分钟是让试剂渗透血迹，分解有机物形成发光络合物。有研究证明，新鲜血迹发光时间比陈旧血迹长3倍，因为陈旧血迹酶活性下降。所以正确操作能提高检测准确率，避免误判。